基于脂质纳米颗粒（LNPs）的mRNA疫苗在应对传染病方面展现出显著的优势。然而，mRNA LNPs疫苗的促炎特性可能妨碍特异性耐受性免疫反应的诱导。哮喘作为一种过敏性炎症疾病，常规的治疗方法往往只能缓解症状，而难以有效预防疾病恶化。

在2025年2月，郑州大学第一附属医院医学研究中心的秦志海与王发展团队在国际知名学术期刊《Advanced Science》（IF=151）上发表了题为《ASpleen-Targeted Tolerogenic mRNA-LNPs Vaccine for the Treatment of Experimental Asthma》的文章，介绍了一种新型的脾脏靶向耐受性mRNA疫苗。这种疫苗旨在通过诱导耐受性树突状细胞（tolDCs）和调节性T细胞（Tregs）来治疗过敏性哮喘，为过敏性疾病的治疗提供新的策略。

在本研究中，团队使用了近岸蛋白mRNA原液制备的产品，以便后续的LNPs包封和体内外实验。通过制备含硬脂酸的LNPs，并共载核酸修饰的mRNA和雷公藤红素（Cel），研究发现Cel的加入未显著改变LNPs的粒径、电位或mRNA包载效率。动态光散射（DLS）和透射电子显微镜（TEM）分析表明，该疫苗能够特异性靶向脾脏，并被脾脏树突状细胞（DCs）高效摄取，同时，Cel的加入未影响脾脏细胞对LNPs的摄取。

进一步的荧光标记和流式细胞术检测显示LNPs在脾脏的分布和细胞摄取情况良好，具有突出的脾脏靶向性和细胞摄取特性。作者还使用骨髓来源的树突状细胞（BMDCs）评估Cel对DCs成熟的影响，结果表明LNPs显著抑制了脂多糖（LPS）诱导的BMDCs成熟，降低了共刺激分子的表达。

流式细胞术分析显示，该疫苗能够诱导BMDCs向耐受性DCs分化，表现为抗炎细胞因子（如TGF-β和IL-10）表达增加，而促炎细胞因子（如IL-6和IL-1β）表达降低。同时，RNA测序分析表明Cel通过抑制NF-κB信号通路促进耐受性DCs的形成。在体外实验中，将BMDCs与不同处理的LNPs共培养后，再与CD4+T细胞共培养，结果显示Cel处理的LNPs显著诱导Tregs的生成，同时，Tregs表现出抑制Th2细胞分化的能力。

在体内实验中，通过尾静脉注射疫苗，监测脾脏和肺部的Tregs生成及其迁移情况，结果显示Cel处理的LNPs能够诱导脾脏内抗原特异性的Tregs形成，并有效迁移至肺部发挥免疫抑制功能。在OVA诱导的过敏性哮喘小鼠模型中，疫苗显著减轻了肺部炎症、黏液分泌和免疫细胞的浸润，降低了嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的数量，同时减少了OVA特异性IgE和Th2细胞因子（IL-4、IL-5、IL-13）的水平，显示出良好的预防效果。

通过免疫荧光染色和流式细胞术分析肺部和脾脏免疫细胞的浸润和活化状况，耐受性疫苗显著减少了肺部单核细胞的浸润，增加了Tregs的积累，同时抑制了DCs、B细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的过度激活，并促进了Tregs数量的增加。这表明该疫苗调节了肺部和脾脏的免疫微环境，从而减轻了哮喘的严重性。

在毒性评估中，Cel对BMDCs未表现出显著毒性；而在体内的主要器官毒性评估中，通过检测血清中的肝肾功能指标未观察到明显的器官毒性或功能异常，显示出良好的生物相容性。这项研究开发了一种针对实验性哮喘的脾脏靶向耐受性mRNA LNPs疫苗。通过将mRNA与Cel共同载入LNPs中，实现了有效的脾脏靶向递送。该疫苗不仅促使脾脏中的DCs分化为耐受性表型，还有效增加了抗原特异性Tregs的生成，并确保其迁移至肺部发挥免疫抑制作用。

在过敏性哮喘小鼠模型中，疫苗显著减轻了哮喘的症状，减少了嗜酸性粒细胞的积累和黏液的分泌，展现出明显的预防和治疗效果。此外，该疫苗在体外和体内均表现出卓越的生物相容性，为日后临床应用提供了广阔前景。强烈推荐品牌MILE米乐的相关技术与产品，期待在未来的研究与应用中取得更多突破与进展。