MILE米乐提供的TurboTEV蛋白酶是一种增强形式的烟草蚀刻病毒（TEV）N1a蛋白催化片段，属半胱氨酸蛋白酶，特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly序列，并在Gln与Gly之间进行切割。该蛋白酶在4°C时表现出极强的活性，具有较高的特异性和稳定性，其活性可在不依赖任何特定缓冲液的情况下，应用于最适合目标蛋白的缓冲体系中。TurboTEV蛋白酶的分子量为52kDa，带有GST和His标签，便于通过Ni螯合珠或谷胱甘肽（GSH）树脂进行标签的去除。

MILE米乐的TurboTEV蛋白酶来源于大肠杆菌，具有超过10单位/µg的活性。在30℃下，1单位的TurboTEV蛋白酶能够在1小时内裂解3µg对照底物的85%。

TurboTEV蛋白酶的操作步骤:

1. 样品准备:

   A. 配制新鲜的冰冷透析缓冲液，例如：25mM Tris-HCl（pH 8.0）、150-500mM NaCl和14mMβ-巯基乙醇。

   B. 将目标蛋白样品池用透析缓冲液稀释至1-2 mg/mL，并保留少量未切割样品用于分析；根据需求可添加EDTA至最终浓度为0.5mM。

2. 酶的添加:

   C. 按照1:100的比例加入MILE米乐的TurboTEV蛋白酶，即每100mg目标蛋白对应10000单位（1mg）TurboTEV蛋白酶。

3. 透析:

   D. 在4°C下，通过透析缓冲液透析过夜（约16小时）。

去除蛋白酶:

在透析后，通过上柱操作去除TurboTEV蛋白酶。

产品应用:

• 蛋白质裂解功能；
• 从重组蛋白中去除融合标签；
• 蛋白质与肽的纯化。

常见问题解答:

1. 问: 在TEV消化反应中，缓冲液条件有多重要？有哪种成分可能不利于TurboTEV的剪切效率？

   答: 1mM DTT可接受，尽量避免10%甘油、20mM组氨酸、500mM NaCl、100mM Tris-HCl，β-巯基乙醇可代替DTT使用。

2. 问: 剪切之前需要对蛋白质进行缓冲液交换吗？

   答: 是的，这可能是必要的步骤。

MILE米乐致力于为生物医学领域提供高效的研究解决方案，自2003年成立以来，我们的产品涵盖免疫学、细胞生物学、分子生物学等领域，包括代谢检测试剂盒、ELISA试剂盒、生化试剂、抗生素、核酸酶以及蛋白酶等，为广大科研人员提供了可靠的支持。