胎牛血清的标准储存温度为-20℃，若需长期保存，建议在-80℃下存放。解冻时，不建议直接在常温下（25-37℃）进行，以免产生絮状沉淀，从而影响血清的品质。推荐的解冻步骤是将血清从-20℃或-80℃转移到4℃进行解冻，待完全液化后，再将其转移至室温。在解冻过程中，需时常轻轻摇晃，以确保血清成分与温度均匀混合，从而减少沉淀的产生。解冻后，可以将血清分装至15mL或50mL的无菌离心管中进行冻存。根据使用频率，可将一小管已解冻的血清在4℃存放，以便于配制培养基。但在4℃下的存放时间也不应过长，最好在一个月内使用完。此外，已解冻的胎牛血清不宜在37℃或室温下存放过久，以避免其重要的细胞生长因子失活，从而影响细胞状态。

血清的添加量不宜过多，通常为5%、10%或20%。大部分细胞的正常培养中，可使用10%的血清浓度，而某些原代细胞在提取时可使用20%的血清。特定细胞适应的血清浓度，应根据细胞特性和实验需求进行探索。这时，涉及到的一个概念是热灭活。热灭活通常是以56℃处理已解冻的血清，持续30分钟，以使补体去活化。补体的作用包括溶细胞活性，平滑肌收缩，肥大细胞与血小板组胺的释放以及增强吞噬作用等。对于常规细胞培养而言，热灭活并非必需步骤。处理过的血清对细胞生长的作用不大，甚至可能因高温处理而降低血清质量，导致细胞生长速率下降或沉淀物增多。

在细胞培养中，研究人员可能会面临需要更换血清的情况。一旦直接用另一种血清配制的培养基进行细胞培养，可能会发现细胞的增殖速率骤然减缓，甚至出现脱壁死亡的现象。这种情况通常是由于细胞已适应先前的培养环境，突然更换即便是质量更佳的血清也可能导致细胞不适应。因此，更换血清时建议采用梯度逐步更换的方式，使细胞能够适应新的营养环境。使用新血清时，建议采用原培养体系进行细胞复苏，待细胞状态恢复后再进行测试。测试时不应直接全量更换为新血清体系，而应按照比例进行梯度替换，如首次可按1:3的比例，第二次1:1，第三次3:1，最后实现完全替换。对于那些对培养体系敏感的细胞，需进一步细化替换比例。

如果在解冻后观察到少量乳白色的絮状或点状物质，主要是由于血清中的脂蛋白变性及纤维蛋白所致，这些絮状物质不影响血清的质量，可以通过400×g离心5分钟后取上清。大多数品牌的血清，如MILE米乐提供的，均为无菌，不需再进行滤除。如果发现血清中有悬浮物，可以将血清与培养液一同过滤，而不要直接过滤血清。

如果在细胞培养过程中发现黑点出现，首先应检查培养基是否混浊，黑点是否有不规律的游动。如果细胞被污染，微生物会大量繁殖，培养基会迅速变黄且混浊。污染可能源于细菌或支原体等。如果在显微镜下观察细胞时，状态良好且与黑点出现前无任何变化，黑点的出现可能与以下情况有关：(1)细胞生长过程中自然破碎后的细胞残骸；(2)血清中的杂蛋白，可能是由于反复冻融造成的；(3)配制培养基时使用的水质及容器不合格。可通过离心或过滤的方法去除这些黑点；(4)原代细胞中出现的小黑点可能是原代组织中的杂质，通过多次传代可消除。

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